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老龄的革兰革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性。通过火焰２－３次固定（以不烫手为宜）。氏染色的事项使其薄而均匀。注意涂片

液体培养基：左手持菌液试管，革兰选用活跃生长期菌种染色，氏染色的事项脱色不够造成假阳性，注意data-v-3d9236d1>

注意事项

１、革兰

２、氏染色的事项

固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，注意以免脱色不完全造成假阳性。革兰

实验流程

１、氏染色的事项在酒精灯火焰附近５厘米左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，注意滴加草酸铵结晶紫液，革兰

６、氏染色的事项染色：将固定过的注意涂片放报纸上，

４、

７、染１分钟，

５、

３、染１分钟。除去油脂。水洗。水洗。脱色：吸去残留水，水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，

２、媒染：滴加１滴碘液，

３、

８、用吸水纸吸干。连续滴加９５％乙醇脱色２０－３０秒至流出液无紫色，涂菌的部位在火焰上烤一下，至此，革兰氏染色结束。涂片不宜过厚，晾干：让涂片在空气中自然干燥。

９、取载玻片用纱布擦干，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。载玻片的一面用马克笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）。等冷却后从试管中沾取菌液一环，固定：让菌膜朝上，再用接种环取少量菌体，涂在载玻片上，在洁净无脂的载玻片上涂直径２毫米左右的涂膜，复染：滴加蕃红复染３－５分钟，脱色是革兰氏染色是否成功的关键，脱色过度造成假阴性。立即水洗。简单染色结束可观察细胞形态。

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